Edman-N-末端氨基酸测序分析服务

提供Edman、PPSQ等检测,对纯化后的蛋白或多肽样品进行N端氨基酸序列的逐一解析,可连续测定多个氨基酸残基,适用于重组治疗性蛋白、单克隆抗体、融合蛋白、多肽类药物等。

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服务背景

当前,随着生物制药行业的蓬勃发展,大量重组蛋白药物、单克隆抗体、融合蛋白等生物制品需要进行严格的一级结构表征。国际人用药品注册技术要求协调会(ICH)Q6B指南明确建议采用N端测序(如Edman降解法)来确认蛋白药物的身份与结构。在这一背景下,专业化的Edman N-末端氨基酸测序分析服务应运而生,为科研机构和制药企业提供了精准可靠的N端序列解析解决方案。

服务内容

N端氨基酸序列测定:对纯化后的蛋白或多肽样品进行N端氨基酸序列的逐一解析,可连续测定多个氨基酸残基。常见有效读长可达60-70个氨基酸,实际项目中一般不超过100个。

N端修饰分析:判断N端是否存在乙酰化、甲酰化、焦谷氨酰化等封闭修饰。当Edman降解无法进行时,反而提示可能存在N端封闭修饰。

信号肽切割位点确认:精确定位信号肽的剪切位置,验证成熟蛋白的N端是否正确。

数据报告交付:提供包括原始色谱图、序列比对结果、技术说明在内的完整报告。

仪器设备:N端测序仪(PPSQ)

服务范围

· 重组治疗性蛋白、单克隆抗体、融合蛋白

· 多肽类药物、合成多肽

· 疫苗抗原、细胞因子、酶制剂

· 天然提取蛋白(动物、植物、微生物来源)

· PVDF膜转印蛋白条带、SDS-PAGE胶内蛋白

常见问题解答

Edman测序一次可以测定多少个氨基酸?
Edman降解法一次通常可以连续读取几十个蛋白质N端氨基酸,常见有效读长约为60-70个氨基酸,实际项目中一般不超过100个。若需要获得更长的N端序列或蛋白全长序列,通常需要将蛋白酶切为多个短肽段,再结合Edman测序、质谱测序或de novo测序进行拼接和验证。
Edman测序对样品有什么具体要求?
样品需高度纯化(建议纯度>90%),避免含有盐离子、表面活性剂、甘油等抑制剂,这些物质会抑制PITC与N端氨基酸的反应。建议送样量不低于50 pmol。样品可为液体、冻干粉或PVDF转膜样品。

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