外泌体生物学性质检测服务

提供粒径与浓度检测、纳米颗粒追踪分析(NTA)、动态光散射(DLS)等检测,采用光散射原理追踪纳米颗粒在溶液中的布朗运动,从而计,适用于基础研究、药物递送系统开发、诊断标志物发现、治疗用外泌体质控。

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服务挑战

1. 异质性问题。 外泌体是生命体内天然存在的通信工具,而非人工设计的均一产品。每一个外泌体都是细胞在特定状态下分泌的“信使”,携带的分子组成高度依赖于生产细胞的类型、状态和所处的微环境。外泌体的异质性使得其分类和质量控制具有极大的挑战性。

2. 表征方法局限。 外泌体等生物大分子体系因异质性高、结构复杂,传统表征技术往往面临准确性不足、需多种方法交叉验证等挑战。

3. 标准化缺失。 从实验室到临床的产业化之路,仍面临机制不明、工艺复杂、质控缺失等系统性挑战。

服务内容

1.粒径与浓度检测

· 纳米颗粒追踪分析(NTA): 采用光散射原理追踪纳米颗粒在溶液中的布朗运动,从而计算获得颗粒的粒径分布和溶液中的颗粒浓度。NTA技术能够定量分析外泌体的浓度和粒径分布,与电镜和Western Blot并列,被认为是外泌体研究领域内公认的三项标准表征技术之一。

· 动态光散射(DLS): 分析外泌体的粒径分布和扩散特性。

· 纳米流式检测: 使用纳米流式仪测量粒径和浓度。

2.Zeta电位检测

Zeta电位是悬浮颗粒滑动面的电势,反映颗粒间静电排斥或吸引的程度。通过Zeta电位测量可以评估外泌体表面电荷状态,从而判断其胶体稳定性和聚集倾向。研究显示,外泌体膜表面通常带负电荷。

3.形态学观察

· 透射电子显微镜(TEM): 采用重金属盐进行负染色,展示外泌体样品的超微结构表征,分辨率可达0.1 nm。TEM可观察到外泌体典型的茶托状或杯状结构。

· 扫描电子显微镜(SEM): 观察外泌体表面形态和拓扑结构。

· 原子力显微镜(AFM): 对外泌体进行纳米尺度的显微成像与表征。

4.纯度与杂质检测

涵盖纯度评估、聚集状态分析、蛋白质杂质检测、微生物污染检测、内毒素检测等。

5.表面标志物检测

通过Western Blot、流式细胞术、ELISA等方法检测外泌体特异性表面蛋白的表达,如CD9、CD63、CD81、TSG101、Alix等。ISEV建议至少包括1个跨膜蛋白和1个细胞溶质蛋白、1个阴性蛋白质标志物。

仪器设备:纳米流式仪、显微镜等。

服务范围

基础研究、药物递送系统开发、诊断标志物发现、治疗用外泌体质控、工业制备外泌体检测等。

常见问题解答

NTA检测时浓度结果偏大可能是什么原因?
外泌体样本中若含有蛋白质聚集体、脂蛋白或细胞碎片,会干扰NTA结果。建议严格纯化步骤,超速离心后结合密度梯度离心或尺寸排阻色谱进一步纯化。
检测周期需要多久?
常规检测一般3-10个工作日,具体取决于样品类型和检测方法。

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