质谱法全序列分析服务
提供全覆盖序列测定、突变与变体分析、N/C端分析等检测,采用多种蛋白酶(胰蛋白酶、Lys-C、Glu-C等)平行酶解,结合LC-MS/MS获得重叠肽段,拼接得到全长序列。适用于重组蛋白、单抗/双抗、融合蛋白、多肽激素等。
在线咨询获取方案服务背景
随着生物技术药物(如单抗、融合蛋白、重组亚单位疫苗)的快速发展,监管机构对蛋白质一级结构的验证要求日益严格。质谱法凭借高灵敏度、高通量及兼容复杂修饰的优势,已成为蛋白质全序列分析的首选技术。我们据此建立了一套完整服务方案,满足从早期发现到质量控制的全周期需求。
服务挑战
传统Edman降解法无法测序N端封闭或修饰的蛋白;
复杂样品中可能存在序列突变、剪接变体或未知修饰;
样品量稀少、纯度不足也会导致序列覆盖率低。
服务内容
· 全覆盖序列测定:采用多种蛋白酶(胰蛋白酶、Lys-C、Glu-C等)平行酶解,结合LC-MS/MS获得重叠肽段,拼接得到全长序列。
· 突变与变体分析:检测点突变、缺失、插入及剪接变体,定位变异位点并计算相对丰度。
· N/C端分析:鉴定N端焦谷氨酸环化、乙酰化等封闭修饰;确证C端序列完整性。
· 二硫键及错配分析:非还原酶解结合PNGase F处理,绘制二硫键连接图谱。
· 序列覆盖率报告:提供百分百覆盖率的验证数据与肽段匹配列表。
仪器设备:液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)
服务范围
· 蛋白类型:重组蛋白、单抗/双抗、融合蛋白、多肽激素、酶、疫苗抗原。
· 样品状态:溶液(冻干粉可复溶)、凝胶条带(考染/银染)、低至1μg。
· 物种来源:哺乳动物、微生物、植物及合成蛋白均可。
我们的优势
· 100%序列覆盖:针对高GC含量或疏水区优化酶切与色谱条件,确保无缺口。
· 低至皮摩尔级:1μg样品即可完成全序列分析,适配珍贵样本。
· 复杂修饰兼容:同时鉴定磷酸化、糖基化、乙酰化等修饰,不干扰主序列判定。
· 合规性支持:报告符合IND申报对结构表征的要求,数据可追溯。