质谱法全序列分析服务

提供全覆盖序列测定、突变与变体分析、N/C端分析等检测,采用多种蛋白酶(胰蛋白酶、Lys-C、Glu-C等)平行酶解,结合LC-MS/MS获得重叠肽段,拼接得到全长序列。适用于重组蛋白、单抗/双抗、融合蛋白、多肽激素等。

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服务背景

随着生物技术药物(如单抗、融合蛋白、重组亚单位疫苗)的快速发展,监管机构对蛋白质一级结构的验证要求日益严格。质谱法凭借高灵敏度、高通量及兼容复杂修饰的优势,已成为蛋白质全序列分析的首选技术。我们据此建立了一套完整服务方案,满足从早期发现到质量控制的全周期需求。

服务挑战

传统Edman降解法无法测序N端封闭或修饰的蛋白;

复杂样品中可能存在序列突变、剪接变体或未知修饰;

样品量稀少、纯度不足也会导致序列覆盖率低。

服务内容

· 全覆盖序列测定:采用多种蛋白酶(胰蛋白酶、Lys-C、Glu-C等)平行酶解,结合LC-MS/MS获得重叠肽段,拼接得到全长序列。

· 突变与变体分析:检测点突变、缺失、插入及剪接变体,定位变异位点并计算相对丰度。

· N/C端分析:鉴定N端焦谷氨酸环化、乙酰化等封闭修饰;确证C端序列完整性。

· 二硫键及错配分析:非还原酶解结合PNGase F处理,绘制二硫键连接图谱。

· 序列覆盖率报告:提供百分百覆盖率的验证数据与肽段匹配列表。

仪器设备:液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)

服务范围

· 蛋白类型:重组蛋白、单抗/双抗、融合蛋白、多肽激素、酶、疫苗抗原。

· 样品状态:溶液(冻干粉可复溶)、凝胶条带(考染/银染)、低至1μg。

· 物种来源:哺乳动物、微生物、植物及合成蛋白均可。

我们的优势

· 100%序列覆盖:针对高GC含量或疏水区优化酶切与色谱条件,确保无缺口。

· 低至皮摩尔级:1μg样品即可完成全序列分析,适配珍贵样本。

· 复杂修饰兼容:同时鉴定磷酸化、糖基化、乙酰化等修饰,不干扰主序列判定。

· 合规性支持:报告符合IND申报对结构表征的要求,数据可追溯。

常见问题解答

能否检测D-氨基酸或异构化?
常规全序列分析针对L-氨基酸。如需检测D-型或Asp异构化,建议额外订购手性氨基酸分析或异构化确证服务。
分析周期多长?
标准服务为15-20个工作日(从收到合格样品起)。加急项目可协调至10个工作日。

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