宿主HCP定量检测方法开发验证检测服务
提供HCP抗原及校准品制备、HCP多克隆抗体制备、ELISA检测体系开发等检测，评估，采用法规规定的蛋白定量方法进行赋值，并溯源至国家标准品或BSA国，适用于CHO、HEK293、大肠杆菌、酵母等主流表达系统。
在线咨询获取方案服务挑战
特异性难题。 检测用抗体可能与产品主蛋白或制剂成分发生非特异性结合，导致假阳性；或者抗体覆盖率不足，特别是对低分子量或酸性HCP的识别能力弱，造成假阴性。
方法学验证要求严格。 检测体系开发完成后，需要根据ICH及药典要求进行分析方法验证的评估，确保整个检测体系的线性、范围、检测限、定量限、准确度、精密度、专属性以及耐用性等满足法规要求。
生命周期管理的复杂性。 从校准品表征到抗体覆盖率，从供应稳定性到申报合规，每一步都可能成为研发进程中的“拦路虎”。
服务内容
1. HCP抗原及校准品制备。 使用空细胞或空载细胞模拟实际生产工艺进行生产，根据实际工艺收获制备相应的抗原。校准品作为关键原材料，采用冻干工艺制备以确保稳定性，用单因素方差分析方法进行均一性评估，采用法规规定的蛋白定量方法进行赋值，并溯源至国家标准品或BSA国家标准品。
2. HCP多克隆抗体制备。 动物免疫前确认待免疫动物的血清对目标产品蛋白无交叉反应。采用可靠的免疫策略制备尽可能高覆盖率的抗体。免疫过程中进行血清效价检测，收获血清后采用Protein G纯化，对抗体进行浓度、纯度、效价等性能表征。得到符合性能要求的抗体后，采用经过验证的2D或LC-MS方法进行抗体覆盖率表征。
3. ELISA检测体系开发。 主要包括原辅料的筛选和制备研究、各组分工艺及反应体系研究、稳定性研究等。优化抗体的浓度、配比、缓冲液的离子强度及pH、反应温度与时间、封闭方法、洗涤与干燥等工艺参数。抗体标记过程需在维持抗体构象稳定的前提下选择兼容性好的标记物，并对偶联方法进行优化评估。
4. 分析方法验证。 根据ICH Q2(R2)及药典要求进行全面验证，涵盖线性、范围、检测限、定量限、准确度、精密度、专属性以及耐用性等参数。
5. 抗体覆盖率验证。 通过2D-Western blot、IMBS-2D或IMBS-LC-MS等方法，对抗HCP多克隆抗体所能识别的宿主细胞蛋白种类进行系统评估。
仪器设备：2D液相色谱（2D-LC）、液质联用色谱仪（LC-MS）等
服务范围
宿主细胞类型全覆盖。 服务全面适配CHO、HEK293、大肠杆菌、酵母等主流表达系统。
产品开发全阶段覆盖。 涵盖临床前研发、临床III期及商业化生产等全阶段需求。在早期工艺开发阶段可采用通用型HCP检测试剂盒进行工艺监控与风险评估；进入临床III期及商业化阶段后，则开发工艺特异型或平台型HCP ELISA试剂盒，满足放行检测和注册申报要求。
多技术平台服务。 包括基于ELISA的定量检测方法开发与验证、基于LC-MS/MS的HCP鉴定与定量分析、抗体覆盖率验证（2D-WB、IMBS-2D、IMBS-LC-MS）、以及符合GMP的常规检测服务。
我们的优势
1. 全流程自有开发平台。 建立高质量的HCP ELISA试剂盒全流程自有开发平台，涵盖抗原表征/制备、动物免疫、抗体制备、体系开发及验证平台，确保输出的检测试剂盒性能满足申报需求。
2. 先进的技术能力。 自主研发基于IMBS的抗体覆盖率检测方法和基于核酸文库的低丰度HCP富集技术。建立HCP分析表征前沿的LC-MS技术平台，涵盖抗原一致性评价、覆盖率验证、生信分析、数据库等完整的HCP分析流程。对于IMBS、LC-MS HCP检测技术已按照方法验证要求进行全面验证，满足法规要求。
3. 合规的方法学验证。 按照ICH Q2(R2)、中国药典及FDA相关指南要求完成完整的方法学验证。验证参数包括准确度、精密度、线性、专属性、检测限与定量限等，满足注册申报及商业化放行需求。
