质谱法末端氨基酸测序分析服务

提供SDS-PAGE、LC-MS、MS等检测,采用高分辨质谱法对蛋白质/多肽的N端氨基酸序列进行测定,适用于生物制药与抗体药物、蛋白药物质量控制、蛋白质组学研究等。

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服务背景

随着生物制药行业的快速发展,抗体类药物、重组蛋白及多肽药物的末端序列分析需求日益增长,传统方法在通量、灵敏度和修饰解析能力上的不足愈发明显。质谱法末端氨基酸测序则解决了这些难题。

服务内容

N端序列分析:采用高分辨质谱法对蛋白质/多肽的N端氨基酸序列进行测定。样品经SDS-PAGE分离目标蛋白后使用蛋白酶酶解,酶解产物经LC-MS/MS分析,通过二级质谱图与理论序列比对确定N端序列。服务可提供N端20个以上氨基酸的序列信息。

C端序列分析:将蛋白质经胰蛋白酶等酶切后,直接用串联质谱测定酶切肽段混合物,通过一级质谱选择C端肽段离子进行二级质谱碎裂,获得C端序列信息。该方法所需样品量少、速度快。

复杂样品分析:对于含有N端封闭、翻译后修饰(如磷酸化、糖基化、乙酰化等)或复杂修饰的蛋白/多肽样品,质谱法可有效克服传统方法的限制,准确定位修饰位点并解析序列。

全序列分析(可选) :对于分子量在800-4000Da范围内的多肽类样品,可提供基于MALDI-TOF/TOF或LC-MS/MS的全序列分析服务。

仪器设备:液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)

服务范围

· 生物制药与抗体药物

· 蛋白药物质量控制

· 蛋白质组学研究

· 食品与药品监测

我们的优势

1. 突破N端/C端封闭限制:质谱法不受N端或C端封闭及修饰位点的干扰,可对传统Edman降解法无法测定的封闭蛋白进行有效分析。

2. 高灵敏度与高通量:质谱法具有极高的检测灵敏度,所需样品量少(可达fmol级别),且可同时分析复杂蛋白混合物中的多个目标蛋白。

3. 修饰位点全面解析:可全局检测N端、C端及内部的多种翻译后修饰(磷酸化、糖基化、乙酰化等),并进行精确定位。

常见问题解答

如何处理N端封闭的蛋白样品?
质谱法可直接分析N端封闭的蛋白样品,无需特殊前处理。对于复杂蛋白样品,还可采用N端二甲基化标记策略,通过分析标记位置确定多个蛋白的N端起点。
服务周期多长?
标准服务周期通常为14个工作日左右,具体时间根据样品复杂程度和检测项目而定。

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